生物安全柜詳解（特點，分類，操作要求，注意事項等）

 一、介紹：生物安全柜顧名思義就是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者和實驗室環境以及實驗材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。
二、生物安全等級：
生物安全等級1級（P1）的媒質是指普通無害細菌、病毒等微生物；
生物安全等級2級（P2）的媒質是指一般性可致病細菌、病毒等微生物；
生物安全等級3級（P3）的媒質是指烈性/致命細菌、病毒等微生物，但感染后可治愈；
生物安全等級4級（P4）的媒質是指烈性/致命細菌、病毒等微生物，感染后不可治愈。
三、生物安全柜分類：一般是分為三個等級，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級，是根據結構，氣流速度、氣流類型，排氣方式分的。執行標準是，世界上生物安全柜領域執行的標準歐洲標準EN12469和美國衛生基金會的第49號標準。
四、生物安全柜的安裝要求：
遠離風扇，熱源，空調出風口，實驗室抽風機, 實驗室動線及門口避免安全柜受亂流干擾
機臺上方至少須有6 英吋的空間，左右二側及背后至少須有12 英吋的空間
所有的窗戶都緊閉
安裝地點須為平整及固體式地板
要有專用的電源插座
五、不同級別的生物安全柜作用及特點：
生物安全柜作用：
Ⅰ級生物安全柜是指用于保護操作人員與環境安全、而不保護樣品安全的通風安全柜。適用于對處理樣品安全性無要求且生物危險度等級為1、2、3的媒質的操作。
Ⅱ級生物安全柜是指用于保護操作人員、處理樣品安全與環境安全的通風安全柜，柜內保持負壓狀態，適用于生物危險度等級為1、2、3的媒質的操作。按照美國NSF49標準，一般將Ⅱ級生物安全柜劃分為A1、A2、B1、B2四個類型。
Ⅲ級生物安全柜為臨床生物防護中應用*普遍的一類生物安全柜。臨床中處理高濃度或大容量感染性材料時，級生物安全柜應用*多。
生物安全柜特點：
Ⅰ級生物安全柜是一種裝配有HEPA過濾器的防污染裝置。
對操作者及環境均不受顆粒及感染性生物材料污染。其
工作空間前開口處有定向的向工作空間內流動的氣流。
在負壓狀態下工作。
適合生物污染1，2，3級防護。
空氣的流動為單向、非循環式，空氣流經HEPA過濾器后進入柜內，通過工作臺面后又被過濾、經排氣口排出；
注意：為了保護操作人員安全和保護環境，其向內的非循環吸入氣流遠離操作者；安全柜中的氣體在外排到大氣以前先經過HEPA過濾器過濾。
Ⅱ級生物安全柜從前開口吸入具有表面速度的氣流，保護操作者，垂直的、無顆粒的層流氣體保護工作區內的樣品不會受到交叉感染。
A1型特點：
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風速（計算或測量值）為0.38m/s（75ft/min）；
由靜壓箱送出的，經HEPA過濾器過濾的垂直氣流是垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分；
允許經排出口HEPA過濾器過濾后的氣流返回實驗室；
允許有正壓的污染風道和靜壓箱。
A2型特點
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風速為0.5m/s；
經HEPA過濾器過濾后的垂直氣流是由靜壓箱排出的垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分；
經HEPA過濾器過濾后，所有廢氣才能排到室外，但廢氣不可再進入安全柜循環或返回實驗室；
所有被生物污染的風道和靜壓箱應保持負壓或者被負壓的風道和靜壓箱包圍。
B1型特點：
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風速（計算或測量值）為0.5m/s（100ft/min）；
經HEPA過濾器過濾后的垂直氣流中的絕大部分是由未污染的循環吸入氣流組成；
經HEPA過濾器過濾后的大部分污染的垂直氣流，通過專用風道過濾后排入大氣；
所有被生物污染的風道和靜壓箱應保持負壓，或被負壓的風道和靜壓箱包圍。
B2型特點
維持穿過工作臺開口面的*小平均吸入口風速（計算或測量值）為0.5m/s（100ft/min）；
經HEPA過濾器過濾后的垂直氣流是由實驗室或室外空氣送入的；
所有的吸入氣流和垂直氣流經HEPA過濾器過濾后排入大氣，不再進入安全柜循環或返回實驗室；
所有污染的風道和靜壓箱應保持負壓，或是被直接排風的風道和靜壓箱包圍。
 Ⅲ級生物安全柜適合于嚴禁與操作者相接觸的樣品的操作。
全密封，氣密型結構；至少在0.5" 水柱的負壓下工作
出風口需經過雙HEPA過濾器
適合于生物污染1、2、3、4級防護
工作空間內為經HEPA過濾器凈化的無渦流的單向流空氣。
進入氣流經數個HEPA過濾器過濾后送入安全柜，排出氣流應經雙層HEPA過濾器過濾或通過HEPA過濾器過濾和焚燒來處理。
六、生物安全柜操作規則：
緩慢移動原則：為了避免影響正常的風路狀態，柜內操作時手應該盡量平緩移動。
物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現象產生，在柜內擺放的物品應該盡量呈橫向一字擺開，避免回風過程中造成交叉污染。同時避免堵塞背部回風隔柵影響正常風路。
避免震動原則：柜內盡量避免震動儀器（例如離心機、旋渦振蕩器等）的使用，因為震動會使得積留在濾膜上的顆粒物質抖落，導致操作室內部潔凈度降低，同時如果在前操作面平衡失敗還會引起安全柜對操作者的污染。
不同樣品柜內移動原則：柜內兩種及以上物品需要移動時，遵循低污染性物品向高污染性物品移動原則，避免污染性高的物品在移動過程中產生對柜體內部的大面積污染。
七、生物安全柜操作注意事項：
操作前應將本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流；并且在移入前用75%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。
打開風機5～10分鐘，待柜內空氣凈化并氣流穩定后再進行實驗操作。將雙臂緩緩伸入安全柜內，至少靜止1分鐘，使柜內氣流穩定后再進行操作。
安全柜內不放與本次實驗無關的物品。
柜內物品擺放應做到清潔區、半污染區與污染區基本分開，操作過程中物品取用方便，且三區之間無交叉。
物品應盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。
操作時應按照從清潔區到污染區進行，以避免交叉污染。
為防可能濺出的液滴，可在臺面上鋪一用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵。
柜內操作期間，嚴禁使用酒精燈等明火，以避免產生的熱量產生氣流，干擾柜內氣流穩定；且明火可能損壞HEPA濾器。
工作時盡量減少背后人員走動以及快速開關房門，以防止安全柜內氣流不穩定。
在實驗操作時，不可打開玻璃視窗，應保證操作者臉部在工作窗口之上。在柜內操作時動作應輕柔、舒緩，防止影響柜內氣流。
安全柜應定期進行清潔消毒，柜內臺面污染物可在工作完成且紫外燈消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜體外表面則應每天用1%的84消毒液擦拭。
柜內使用的物品應在消毒后再取出，以防止將病原微生物帶出而污染環境。
安全柜應定期進行檢測與保養，以保證其正常工作。工作中一旦發現安全柜工作異常，應立即停止工作，采取相應處理措施，并通知相關人員。